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使用CCK-8要注意的事項有哪些

更新時間:2021-10-25      點擊次數(shù):1583
  CellCountingKit-8(簡稱CCK8)試劑可用于簡便而準(zhǔn)確的細(xì)胞增殖和毒性分析。相信做細(xì)胞的同學(xué)對他都很熟悉,你確定你使用CCK-8試劑的方式是*正確的嗎?
使用CCK-8要注意的事項有哪些:
  1.酚紅和血清對CCK8法的檢測不會造成干擾,可以通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去。
  2.CCK8可以檢測大腸桿菌,但不能檢測酵母細(xì)胞。在細(xì)胞增殖實驗每次測定的過程中需要避免細(xì)菌污染,以免影響結(jié)果。
  3.當(dāng)在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)時,培養(yǎng)板最外一圈的孔最容易干燥揮發(fā),由于體積不準(zhǔn)確而增加誤差。一般情況下,最外一圈的孔只加培養(yǎng)基,不作為測定孔用。
  4.在培養(yǎng)基中加入CCK8,培養(yǎng)一定的時間,測定450nm的吸光度即為空白對照。在做加藥實驗時,還應(yīng)考慮藥物的吸收,可在加入藥物的培養(yǎng)基中加入CCK8,培養(yǎng)一定的時間,測定450nm的吸光度作為空白對照。
  5.金屬對CCK8顯色有影響:當(dāng)終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會抑制5%、15%、90%的顯色反應(yīng),使靈敏度降級。如果終濃度是10mM的話,將會100%抑制。
  6.懸浮細(xì)胞由于染色比較困難,一般需要增加細(xì)胞數(shù)量和延長培養(yǎng)時間。
  
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